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解析PCR反應中的主要成份模板

日期:2024-09-20 07:30
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摘要:解析PCR反應中的主要成份模板
解析PCR反應中的主要成份模板:
1、PCR反應必須以DNA為模板進行擴增, 模板DNA可以是單鏈分子,也可以是雙鏈分子,可以是線狀分子,也可以是環(huán)狀分子(線狀分子比環(huán)狀分子的擴增效果稍好)。

2、就模板DNA而言,影響PCR的主要因素是模板的數(shù)量和純度.一般反應中的模板數(shù)量為102 -105 個拷貝,對于單拷貝基因,這需要0.1μg的人基因組DNA,10ng的酵母DNA,1ng的大腸桿菌DNA.擴增多拷貝序列時,用量更少。

3、靈敏的PCR可從一個細胞,一根頭發(fā),一個孢子或一個精子提取的DNA中分析目的序列。

4、模板量過多則可能增加非特異性產(chǎn)物。DNA中的雜質(zhì)也會影響PCR的效率。