抗體修復(fù)方法：
方法1：沸水浴修復(fù)，將盛有修復(fù)液和玻片的燒杯置于沸水浴環(huán)境，保持外部沸騰狀態(tài)15min，自然冷卻至室溫；
方法2：微波修復(fù)，將盛有修復(fù)液和玻片的燒杯置于微波爐中，高火5min，?；?min，中火5min，自然冷卻至室溫。
類標記抗體相關(guān)驗室指導(dǎo)：脫片的原因可能有以下幾點：
（1）切片在脫蠟之前沒有進行烤片，一般片子在做之前需烤片。 烤片的目的是將帶有蠟的組織切片牢固地黏在載玻片上，以免染色過程中切片脫落。切片在56—60℃的恒溫箱中至少放置1小時才能達到此目的，但是，通常的烤片溫度為；8～60℃，時間為2—6小時。由于高溫干燥可加速組織中抗原的氧化，因此高溫烤片對抗原有破壞作用；
（2）在貼片前，載玻片處理的不夠干凈。處理載玻片的步驟：洗滌劑洗－水洗－過酸－水洗－酒精浸泡－晾干－多聚賴氨酸掛片－晾干備用；
（3）粘片劑涂的太少或是粘片劑配得濃度不夠。一般用0.1 mg/ml的多聚賴氨酸進行包被。多聚賴氨酸在水溶液中易分解，所以一次不要配太多工作液。配制多聚賴氨酸溶液使用超純水（每100mL已稀釋的多聚賴氨酸溶液要包被的玻片40-90張， 超過90張片子將影響其黏合力），釋過的多聚賴氨酸溶液要放在2-8℃，至少在3個月內(nèi)是穩(wěn)定的；
（4）展片：一定要展開，盡量等標本完全展平在往載玻片上貼！而且貼的時候不要有氣泡，如果展片不好的話，可以多烤一會。掉片也會有是這個原因，特別是標本面積很小的；
（5）切片時盡量要?。?－5微米），平展不要有皺折，組織塊本身不要太大。脂肪組織和軟骨組織本身容易脫片；
（6）如果掉片很多的話，可以考慮ihc過程中的每一步水洗時間盡量縮短（在不影響結(jié)果的情況下）。
保存條件存儲：在- 20°C為一年。避免重復(fù)凍融循環(huán)。凍干抗體穩(wěn)定在至少一個月室溫超過一年保持在20°當(dāng)用無菌PBS pH 7.4緩沖或稀釋的抗體抗體穩(wěn)定至少兩周在2-4°C.本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。
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產(chǎn)品名稱 |
磷酸化HER3受體撫生抗體價格 |
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英文名稱 |
Anti-Phospho-HER3 |
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規(guī)格 |
100ul |
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貨號 |
K215124 |
【相關(guān)標記有】：
Alexa Fluor 350 標記、Alexa Fluor 488 標記、Alexa Fluor 555 標記、Alexa Fluor 647 標記、AP標記、APC標記、Biotin標記、Cy3標記、Cy5標記、Cy5.5標記、Cy7標記、FITC標記、Gold標記、HRP標記、PE標記、PE-Cy3標記、PE-CY5標記、PE-CY5.5標記、PE-CY7標記、RBITC標記.
抗體溶解方法：
方法一：我們的抗體（凍干粉）已經(jīng)包含了0.01M PBS、1% BSA和0.1% 防腐劑（疊氮鈉或慶大霉素），您只需要加入的雙蒸水就行了?？贵w溶解后，置于-20℃保存，好分裝后使用，避免反復(fù)凍融，可保證至少1年有效；
方法二：也可以只加入一半體積的雙蒸水，再用一半體積的甘油補足，置于-20℃保存，這樣抗體不會凍，有利于抗體的穩(wěn)定。
后續(xù)試驗時，再使用對應(yīng)的緩沖液稀釋成工作液，即用即配。
我們的抗體（凍干粉），在常溫放置下，至少一個月有效；若在-20℃下保存（推薦），至少三年有效。
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