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產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:含血清細(xì)胞凍存液

  • 產(chǎn)品型號(hào):FS-X020064
  • 產(chǎn)品**:撫生
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡(jiǎn)單介紹:
含血清細(xì)胞凍存液在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
詳情介紹:

培養(yǎng)步驟:

對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。

3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

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產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號(hào)

含血清細(xì)胞凍存液

100ml

FS-X020064

 

產(chǎn)品名稱:含血清細(xì)胞凍存液

英文名稱:

貨號(hào):BH-X020064

規(guī)格:100ml

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:

主要功能:

(1)血管平滑肌細(xì)胞的再生能力是原發(fā)血管病變的重要因素。

(2)表達(dá)鈣通道及ICAM-1和VCAM-1,參與血管壁的炎癥反應(yīng)。

(3)與血管的進(jìn)展和穩(wěn)定有關(guān)。

 生理變化:

(1)主動(dòng)脈硬化。

(2)主動(dòng)脈瘤

(3)主動(dòng)脈鈣化。

基本特性:

(1)組織來(lái)源于正常大鼠大動(dòng)脈組織。

(2)鑒定:肌動(dòng)蛋白,alpha-SMA和Desmin熒光染色。

(3)原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。

(4)每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù):>5×105 cells/1ml。

(5)肌動(dòng)蛋白,alpha-SMA和Desmin熒光染色驗(yàn)證。

(6)不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原體、酵母。


 

對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。


細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:

 

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;胎牛血清,10%。

2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。

二.細(xì)胞處理:

1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作要點(diǎn):

1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)完全解凍,使細(xì)胞能盡快通過(guò)*易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。

3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。

5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6)觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

阪崎腸桿顯色培養(yǎng)基    1000mL/瓶

亮綠酚紅乳糖蔗糖改良瓊脂    

Dextrose casein-peptone agar 葡萄糖酪蛋白瓊脂    1.10860.0500MERCK默克

Listeria selective enrichment supplement acc.to FDA-BAM 1992    1.11883.0500MERCK默克

Pseudomonas agar F base 假單胞瓊脂F(xiàn)基礎(chǔ)    1.10989.0500MERCK默克

RV R10肉湯    食品、ows\System32\netshell.dll

含血清細(xì)胞凍存液含亮氨酸豐富重復(fù)蛋白3C(LRRC3C)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:LRRC3C ELISA Kit,英文縮寫:LRRC3C,產(chǎn)品別名:含亮氨酸豐富重復(fù)蛋白3C(LRRC3C)ELISA檢測(cè)試劑盒,含亮氨酸豐富重復(fù)蛋白3C(LRRC3C)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。

骨成型蛋白10(BMP10)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:BMP10 ELISA Kit,英文縮寫:BMP10,產(chǎn)品別名:骨成型蛋白10(BMP10)ELISA檢測(cè)試劑盒,骨成型蛋白10(BMP10)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。

胱天蛋白酶激活脫氧核糖核酸酶(CAD)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:CAD ELISA Kit,英文縮寫:CAD,產(chǎn)品別名:胱天蛋白酶激活脫氧核糖核酸酶(CAD)ELISA檢測(cè)試劑盒,胱天蛋白酶激活脫氧核糖核酸酶(CAD)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。

睪丸陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(TAT1)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:TAT1 ELISA Kit,英文縮寫:TAT1,產(chǎn)品別名:睪丸陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(TAT1)ELISA檢測(cè)試劑盒,睪丸陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(TAT1)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。

干擾素α21(IFNα21)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:IFNα21 ELISA Kit,英文縮寫:IFNα21,產(chǎn)品別名:干擾素α21(IFNα21)ELISA檢測(cè)試劑盒,干擾素α21(IFNα21)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。

甘露糖受體C1(MRC1)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:MRC1 ELISA Kit,英文縮寫:MRC1,產(chǎn)品別名:甘露糖受體C1(MRC1)ELISA檢測(cè)試劑盒,甘露糖受體C1(MRC1)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。

鈣黏蛋白18(CDH18)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:CDH18 ELISA Kit,英文縮寫:CDH18,產(chǎn)品別名:鈣黏蛋白18(CDH18)ELISA檢測(cè)試劑盒,鈣黏蛋白18(CDH18)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。

封閉蛋白24(CLDN24)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:CLDN24 ELISA Kit,英文縮寫:CLDN24,產(chǎn)品別名:封閉蛋白24(CLDN24)ELISA檢測(cè)試劑盒,封閉蛋白24(CLDN24)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。

腓骨蛋白7(FBLN7)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:FBLN7 ELISA Kit,英文縮寫:FBLN7,產(chǎn)品別名:腓骨蛋白7(FBLN7)ELISA檢測(cè)試劑盒,腓骨蛋白7(FBLN7)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。

芳乙酰胺去乙酰化酶(AADAC)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:AADAC ELISA Kit,英文縮寫:AADAC,產(chǎn)品別名:芳乙酰胺去乙?;?AADAC)ELISA檢測(cè)試劑盒,芳乙酰胺去乙酰化酶(AADAC)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。

發(fā)動(dòng)蛋白1(DNM1)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:DNM1 ELISA Kit,英文縮寫:DNM1,產(chǎn)品別名:發(fā)動(dòng)蛋白1(DNM1)ELISA檢測(cè)試劑盒,發(fā)動(dòng)蛋白1(DNM1)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。

 

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