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免 疫熒光(IF)樣本準備要求

日期:2024-09-20 07:34
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摘要: 免 疫熒光(immunofluorescence,IF),通常是指用熒光標記的抗體示蹤或檢查樣品中相應抗原的方法。根據(jù)抗原抗體反應,將不影響抗原抗體相互作用的熒光分子標記在抗體上,與其相應的抗原反應后,在熒光顯微鏡下針對熒光標記分子的激發(fā)光發(fā)射光進行觀察,從而檢測目的指標的相對含量、在組織細胞中的定位。 樣本準備要求: 1、取材手法:要求取材器械鋒利,盡可能選擇薄的手術(shù)刀片,減少剪刀的使用,避免擠壓挫傷標本。較準確地取到目的部位組織,夾取標本的時候盡量遠離目的區(qū)域組織。 2、取材速度:盡量...

       免 疫熒光(immunofluorescence,IF),通常是指用熒光標記的抗體示蹤或檢查樣品中相應抗原的方法。根據(jù)抗原抗體反應,將不影響抗原抗體相互作用的熒光分子標記在抗體上,與其相應的抗原反應后,在熒光顯微鏡下針對熒光標記分子的激發(fā)光發(fā)射光進行觀察,從而檢測目的指標的相對含量、在組織細胞中的定位。

樣本準備要求:

1、取材手法:要求取材器械鋒利,盡可能選擇薄的手術(shù)刀片,減少剪刀的使用,避免擠壓挫傷標本。較準確地取到目的部位組織,夾取標本的時候盡量遠離目的區(qū)域組織。

2、取材速度:盡量保證樣本離體后5min內(nèi)放入到合適的固定液內(nèi)。如果一只動物同時取多種器官,優(yōu)先取消化器官,其次取中 樞神經(jīng)系統(tǒng)器官(腦,脊髓等),皮膚、肌肉等可放到后取。

3、組織塊大小:未經(jīng)灌注的標本組織厚度不要超過1cm。

4、固定液:針對不同的標本特點及實驗目的一定要選用正確的固定液。

5、固定液量:固定液體積為組織的10倍,且組織能在容器內(nèi)自由移動,不貼壁不沉底,并做好清晰標記。

6、固定溫度:常溫即可,無需冷藏,切勿冷凍結(jié)冰,否則固定液結(jié)冰形成冰晶嚴重破壞組織形態(tài)結(jié)構(gòu)。