主營產品：
生化試劑，標準品,對照品，PCR試劑盒，?核酸檢測試劑盒，熒光定量檢測試劑盒，生化試劑盒?，比色法試劑盒，酶活性檢測試劑盒，ELISA試劑盒，酶聯免yi檢測試劑盒，試劑盒，ELISA試劑盒，抗體，重組蛋白，分光光度法檢測試劑盒，細胞株，原代細胞，細胞培養(yǎng)基，標準溶液產品。代理并銷售進口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產品。
新聞詳情
RNA的提取步驟
日期：2024-09-20 15:24
瀏覽次數：74
摘要：
RNA提?。?
RNA的提取可以通過下面步驟完成的。
1、離心機4℃預冷，準備試劑：氯仿、異內醇、75%乙醇（用DEPC水配制）、無RNase的水或DEPC水、無酶吸頭及試管，戴口罩、帽子、無粉乳膠手套；
2、取出轉染建模成功24h后的細胞，吸棄培養(yǎng)液，用1×PBS清洗1次；
3、每10cm2生長的細胞加入1mL的Transzol Up, 放置片刻后使用移液槍吹打細胞使其全脫落；
4、用移液槍反復吹吸裂解液直至無明顯沉淀，將裂解液全部轉移至標記好的1.5mL EP管中，室溫靜置5min；
5、往每個EP管中加0.2mL氯仿（Transzol ...
RNA的提取可以通過下面步驟完成的。
1、離心機4℃預冷，準備試劑：氯仿、異內醇、75%乙醇（用DEPC水配制）、無RNase的水或DEPC水、無酶吸頭及試管，戴口罩、帽子、無粉乳膠手套；
2、取出轉染建模成功24h后的細胞，吸棄培養(yǎng)液，用1×PBS清洗1次；
3、每10cm2生長的細胞加入1mL的Transzol Up, 放置片刻后使用移液槍吹打細胞使其全脫落；
4、用移液槍反復吹吸裂解液直至無明顯沉淀，將裂解液全部轉移至標記好的1.5mL EP管中，室溫靜置5min；
5、往每個EP管中加0.2mL氯仿（Transzol Up體積的1/5），混勻振蕩30s，室溫靜置3min；
6、4℃條件下10000g離心15min，離心后RNA主要分布在上層水相中，體積約50%；
7、轉移上層水相于新的EP管中（約400μL，注意不要吸取到下層），每管加入0.5mL異丙醇 （Transzol Up體積的1/2），顛倒混勻，室溫孵育10min；
8、4℃下10000g離心10min后在管側和管底形成膠狀沉淀，吸棄上清，加1mL 75%乙醇吹懸沉淀；
9、4℃下7500g離心5min后棄上清，盡量吸凈，室溫晾干沉淀5min，依細胞量加入30~100μL的RNA溶解液；
10、55℃~60℃金屬浴10min，-80℃冰箱保存?zhèn)溆谩?