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大鼠血纖蛋白原（Fbg）ELISA試劑盒操作步驟
日期：2024-09-20 07:32
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摘要：
大鼠血纖蛋白原（Fbg）ELISA試劑盒操作步驟：
1、包被：用PH9.6的CBS包被液稀釋包被抗原至5μg/ml，酶標(biāo)板中每孔加入50μl，室溫、4℃或37℃過夜包被。
2、洗滌：棄包被液（用力拍干，再用無塵紙吸干），用PH7.2-7.4的1×PBST洗滌液洗板3次（每孔均要加滿），每次3min~5min。
3、封閉：每孔加封閉液（1%BSA）250μl，37℃封閉2h。
4、洗滌：用1×PBST洗滌液洗板3次，每次3min~5min。
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大鼠血纖蛋白原（Fbg）ELISA試劑盒操作步驟：
1、包被：用PH9.6的CBS包被液稀釋包被抗原至5μg/ml，酶標(biāo)板中每孔加入50μl，室溫、4℃或37℃過夜包被。
2、洗滌：棄包被液（用力拍干，再用無塵紙吸干），用PH7.2-7.4的1×PBST洗滌液洗板3次（每孔均要加滿），每次3min~5min。
3、封閉：每孔加封閉液（1%BSA）250μl，37℃封閉2h。
4、洗滌：用1×PBST洗滌液洗板3次，每次3min~5min。
5、結(jié)合一抗：用1×PBST緩沖液1∶1000稀釋被檢血清，每孔100μl，要設(shè)立陰性對照，37℃孵育1.5h。
6、洗滌：同上。
7、結(jié)合酶標(biāo)二抗：每孔加1×PBST緩沖液1000倍稀釋的酶標(biāo)二抗羊抗鼠IgG-HRP（稀釋倍數(shù)根據(jù)產(chǎn)品不同有所不同，可按說明書進(jìn)行）50μl，37℃孵育1h。
8、洗滌：同上。
9、顯色：每孔加底物溶液（TMB）50μl，置室溫避光顯色10min。
10、待顯色后，每孔加入50μl終止液（2mol/L H2SO4）終止反應(yīng)。使用酶標(biāo)儀讀取450nm的OD值，以確定血清抗體水平。