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ELISA標曲顯色過強無明顯梯度分析

日期:2024-09-20 07:28
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摘要: ELISA標曲顯色過強無明顯梯度分析: 1、主要懷疑點:洗板不充分: 1.1、機器洗版:確保機器設置的針頭能吸干孔中液體,并且加液針頭能加液大于350ul,加液針頭沒有被異物或者結晶鹽堵住。 1.2、手動洗板,嚴格按照步驟,使用干凈滅 jun 的槍頭和加樣槽,使用無氧化劑的吸水紙。加350ul洗液,靜置90秒,在吸水紙上拍干孔中液體后再加入下一步洗液或者試劑。 1.3、特別注意,在加入TMB前的洗板步驟極其重要,殘留的HRP酶會直接導致TMB顯色。 2、次要懷疑點: 2.1、TMB 已經(jīng)污染,檢測TMB是...

ELISA標曲顯色過強無明顯梯度分析:

1、主要懷疑點:洗板不充分:

1.1、機器洗版:確保機器設置的針頭能吸干孔中液體,并且加液針頭能加液大于350ul,加液針頭沒有被異物或者結晶鹽堵住。

1.2、手動洗板,嚴格按照步驟,使用干凈滅 jun 的槍頭和加樣槽,使用無氧化劑的吸水紙。加350ul洗液,靜置90秒,在吸水紙上拍干孔中液體后再加入下一步洗液或者試劑。

1.3、特別注意,在加入TMB前的洗板步驟極其重要,殘留的HRP酶會直接導致TMB顯色。

2、次要懷疑點:

2.1、TMB 已經(jīng)污染,檢測TMB是否透明無色,如果偏藍就是污染了。

2.2、檢查配制洗液的水是否污染,要求使用的水是雙蒸水,三蒸水或無離子水,水中的Fe3+,Cu3+,Co3+等過渡金屬,以及HClO都會氧化TMB。

2.3、酶標板受潮,長霉,或者試劑過期。

2.4、環(huán)境污染,空氣中有導致顯色的物質或者粉塵。