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分光光度法基本介紹
日期：2024-09-20 15:42
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摘要：
分光光度法基本介紹
分光光度法是基于不同分子結(jié)構(gòu)的物質(zhì)對(duì)電磁輻射的選擇性吸收而建立起來(lái)的方法，屬于分子吸收光譜分析。當(dāng)光通過(guò)溶液時(shí)，被測(cè)物質(zhì)分子吸收某一波長(zhǎng)的單色光，被吸收的光強(qiáng)度與光通過(guò)的距離成正比。在波長(zhǎng)、溶液和溫度確定的情況下，測(cè)得的摩爾消光系數(shù)是由給定物質(zhì)的特性決定的。
分光光度法是基于不同分子結(jié)構(gòu)的物質(zhì)對(duì)電磁輻射的選擇性吸收而建立起來(lái)的方法，屬于分子吸收光譜分析。當(dāng)光通過(guò)溶液時(shí)，被測(cè)物質(zhì)分子吸收某一波長(zhǎng)的單色光，被吸收的光強(qiáng)度與光通過(guò)的距離成正比。在波長(zhǎng)、溶液和溫度確定的情況下，測(cè)得的摩爾消光系數(shù)是由給定物質(zhì)的特性決定的。
實(shí)際上，分光光度法測(cè)得的摩爾消光系數(shù)也和使用的儀器有關(guān)。因此，在定量分析中，通常并不用已知物質(zhì)的摩爾消光系數(shù)，而是用一個(gè)或多個(gè)已知濃度的待測(cè)物質(zhì)作一條校準(zhǔn)或工作曲線。摩爾消光系數(shù)的意義是即每升含有一摩爾核酸磷的溶液在260 nm波長(zhǎng)處的消光值(即光密度，或稱為光吸收)。其大小反映吸光物質(zhì)對(duì)光的吸收能力，也反映了用吸光度法測(cè)定該吸光物質(zhì)的靈敏度。