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PCR定量試劑盒的使用與特點描述

日期:2024-09-20 07:29
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摘要:
PCR定量試劑盒稀釋PCR陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
    1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 段作為陽性對照。
    2. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
    3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
    4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
    5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
    6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
    7. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

PCR定量試劑盒具有下列特點:
    1.根據(jù) 指標的保守序列設計的專一性引物,與相關病毒無交叉反應。
    2.靈敏度比常規(guī) PCR 高 2-3 個數(shù)量級,可以達到幾百拷貝/反應。
    3.即開即用,用戶只需要提供樣品模板,操作簡單,定量準確快速。
    4.一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續(xù)污染。
    5.本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應體系的熒光定量 PCR。
    6.本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。